解析淋巴細(xì)胞分離液提取淋巴細(xì)胞的方法

更新時(shí)間：2014-03-31 點(diǎn)擊次數(shù)：1956

淋巴細(xì)胞分離液是BI公司*開(kāi)發(fā)的不含任何酵素、蛋白水解酶及動(dòng)物組分的一種試劑。運(yùn)用離子螯合技術(shù)使貼壁細(xì)胞溫和的脫落，zui大程度地保留完整的細(xì)胞表面蛋白及其生物功能，長(zhǎng)時(shí)間使用也無(wú)需擔(dān)心細(xì)胞受損。

淋巴細(xì)胞分離液可適用于血清及不含血清培養(yǎng)細(xì)胞，貼壁更緊密的細(xì)胞可選用木瓜蛋白酶或結(jié)晶胰酶。

淋巴細(xì)胞分離液細(xì)胞漂浮密度：1.077±0.001g/ml，成分：用泛影酸葡甲胺和右旋糖苷及氯化納等配制而成的滅菌水溶液，包裝體積：250ml，貯存：4-25℃避光保存，有效期1年，啟封后貯存于冰箱，使用范圍：適用于人淋巴細(xì)胞分離液。

淋巴細(xì)胞分離液提取淋巴細(xì)胞的方法：

1、采取外周靜脈血3ml

2、采用3ml N-S 或Hanks 液做對(duì)倍稀釋處理，即總體積為6ml

3、取一中試管，加入2ml的淋巴細(xì)胞分離液，然后將6ml稀釋過(guò)的血液小心加到分離液的上表面，剛開(kāi)始加時(shí)，動(dòng)作一定要慢要輕柔，后面可以加快速度，使分離液和血液zui終的比例為1：3，分離液界面保持清楚

4、離心，2000rpm ，20min，然后吸取PBMC

5、洗滌，將放有PBMC的離心管用N-S 充盈至10ml，混勻，2000rpm，10min，再洗滌兩次，并將轉(zhuǎn)速降為1000rpm，10min，即可得到PBMC

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